필라멘트 곰팡이 trichoderma viride로부터 항 종양 파치 슬롯 공략 L- 리신 α- 옥시 다제의 재조합 발현, 분자 특성 및 X- 선 결정 구조 분석

L- 리신 α- 옥시 다제 (Lysox) (EC 1.4.3.14)는 코엔자임에서 FAD를 갖는 플라빈 파치 슬롯 공략이며, L- 아미노산 산화 파치 슬롯 공략 (LAO)의 유형이며, 이는 L- 리신의 산화 디 아노 반응을 촉매하고 α- 케토 ε- 아미노이드 산화물 및 ammonia를 생성한다. 뱀 독에서 유도 된 일반적으로 알려진 라오스는 낮은 기질 특이성을 가지지 만 L- 리신에는 거의 영향을 미치지 않습니다. 그러나 필라멘트 곰팡이Trichoderma 파치 슬롯 공략2902_3595t. 파치 슬롯 공략브랜 문화라는 개별 배양 방법을 사용하여 약 2 주 동안 성장해야하며, TV Lysox는 박테리아 외부에서 분비 되므로이 방법을 사용하여 파치 슬롯 공략를 생산하고 정제하기가 어렵고 회복은 소량입니다. 따라서이 연구에서 저자는 actinomycetes를 보여주었습니다.Streptomyces LiviadansTK24를 사용하여 이종 발현 시스템을 구성하기 위해 테스트. 니트릴 히드라 타제 (H-NHASE) 프로모터를 사용하여, GC 함량이 52%에서 65%로 증가한 유전자는 이번에 수득 된 전장 Lysox cDNA (DDBJ AB937978)를 사용하여 제조 하였다 (DDBJ AB937978)는 코돈을 최적화하여 액 티노 마이코 세트에서 더 쉽게 발현 할 수 있도록 하였다. 결과적으로 TV Lysox에 대한 이종 표현 시스템을 성공적으로 구성하기 시작했습니다. 또한, 박테리아 외부 의이 발현 시스템에서 파치 파치 파치 파치 슬롯 공략 공략 공략 공략 활성이 관찰되었으므로, 매우 간단한 정제 시스템이 확립되었다. (정제 된 파치 파치 파치 파치 슬롯 공략 공략 공략 공략의 특정 활성은 80 U/mg이다). 또한,이 연구에서, Lysox의 3 차원 구조는 처음으로 1.9Å의 해상도로 결정되었다. Lysox는 비대칭 단위의 2 개의 분자에 존재하며, Glu4로부터 Leu512까지의 아미노산 잔기를 측정 하였다 (PDB : 3x0V). 구조를 살펴보면, 활성 포켓 입구 근처의 산성 및 기본 잔류 물의 수는 뱀 독으로부터 CR Lao의 경우 7 : 8이었고, Lysox에는 10 : 5에서 2 배의 산성 잔기가 있었고, L- 글루타메이트 옥시 다제 (LGOX)에는 산성 아미노산에 기초한 Lglutamate 옥시 다제 (LGOX)는 6 : 8이 있었으며, 많은 양의 기본 잔류 물이있었습니다. 낮은 기질 특이성 CR LAO의 산성 및 기본 잔기의 비율은 거의 동일했으며, 입구 근처의 분포에서는 바이어스가 관찰되지 않았다. 대조적으로, Lysox는 많은 산성 잔기를 가지고 있으며 입구 근처의 전하에 의해 기질 선택이 수행되는 것으로 제안되었다. 다음으로, 우리는 L-LYS가 도킹 시뮬레이션을 사용하여 Lysox Active Central 잔류 물 및 Lysox와 어떻게 상호 작용했는지 계산하여 모델을 얻었습니다. ASP212는 기질 L-Lys와 상호 작용하고 중요한 잔류 물로 간주되었다. 위에서 언급 한 바와 같이, Lysox의 엄격한 기질 특이성에 관여하는 구조적 특징은 기질 흡입구에서 산성 환경에서 관찰되었다.

일본 생화학 학회 J. Biochem., 157, 549-559 (2015)
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Amano Mari, Mizugchi Haruka, Sano Zay Hisashi, Kondo Hiroki, Shinyashiki Kengo, 파치 슬롯 공략 Junko, Tamura Takashi, Kawaguchi Tatsuya, Kusakabe Hitoshi, Imada Katsumi, 파치 슬롯 공략 Kenji

*위의 발표 된 논문은 "2016 Japan Biochemical Society JB Paper Award"를 수상했습니다.


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파치 슬롯 공략 환경 생명 과학 대학원 (농업 교수)
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